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產(chǎn)品詳情

SY0153 NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒

  • 產(chǎn)品/服務(wù):SY0153 NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒
  • 型 號:SY0153
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價(jià):面議 
  • 更新日期:2023-05-31
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):1047
產(chǎn)品簡介

NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供,用于科研目的,NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒是我司眾多優(yōu)質(zhì)報(bào)告基因檢測之一,質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品,價(jià)格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

特別提示:包括NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱:NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒
英文名稱:NF-κB GFP Reporter Plasmid
產(chǎn)品貨號:SY0153
產(chǎn)品規(guī)格:1μg

NF-κB-GFP報(bào)告基因是用于檢測NFκB轉(zhuǎn)錄活性水平為目的的報(bào)告基因。 NF-κB基因在炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答和抑制細(xì)胞凋亡等方面有著重要的作用。

NF-κB-GFP報(bào)告基因主要應(yīng)用于NF-κB信號通路的研究和基于NF-κB信號通路的藥物研究以及癌細(xì)胞中NF-KB的調(diào)控機(jī)制的研究。

pGMNF-ΚB-GFP是我公司改造后的哺乳動物真核表達(dá)載體,在其多克隆位點(diǎn)插入了多個NF-κB結(jié)合位點(diǎn),可以地檢測NF-κB的激活水平。由于載體采用了GFP作為報(bào)告基因,更便于后續(xù)的檢測。同時(shí),對載體中預(yù)測出的其它轉(zhuǎn)錄因子以外的結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行了適當(dāng)?shù)耐蛔?,增加了質(zhì)粒的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合特異性。另外,由于質(zhì)粒體積減小,使得NF-κB-GFP報(bào)告基因更易于轉(zhuǎn)染。

質(zhì)粒圖譜



pGMNF-κB -GFP質(zhì)粒測序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用說明
pGMNF-κB -GFP可以采用常規(guī)轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染哺乳動物細(xì)胞。
TNF-α、IL-1β和LPS等是常見的NF-κB激活劑,可作為NF-κB報(bào)告基因的陽性對照。

注意事項(xiàng)
1)本質(zhì)粒未經(jīng)我公司允許不得用于任何商業(yè)用途,也不得移交給訂貨人實(shí)驗(yàn)室以外的任何人或單位。
2)為了您的健康,實(shí)驗(yàn)操作時(shí)請穿實(shí)驗(yàn)服和帶一次性手套。

儲存條件:-20℃。

根據(jù)您的關(guān)注的NF-κB-GFP報(bào)告基因質(zhì)粒,您可能還對以下產(chǎn)品有需求:


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名稱:螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒(海腎)
貨號:YT272
規(guī)格:100次|1000次
本試劑盒是一種以腸腔素為底物來檢測海腎螢光素酶,簡稱renilla luciferase活性的試劑盒。

海腎螢光素酶是一種分子量約為36kD的蛋白,在氧氣存在的條件下,可以催化Coelenterazine氧化成Coelenteramide。在Coelenterazine氧化的過程中,會發(fā)出生物螢光。生物螢光可以通過化學(xué)發(fā)光儀或液閃測定儀進(jìn)行測定。本試劑盒的檢測原理參考下圖。


海腎螢光素酶的檢測原理圖。

通過螢光素和螢光素酶這一生物發(fā)光體系,可以非常靈敏、地檢測基因的表達(dá)。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或5’啟動子區(qū)克隆在luciferase的上游,或把3’-UTR區(qū)克隆在luciferase的下游等,構(gòu)建成報(bào)告基因質(zhì)粒。然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞,用適當(dāng)藥物等處理細(xì)胞后裂解細(xì)胞,測定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。海腎螢光素酶一方面常用作螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測的內(nèi)參,以消除由于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率不同而帶來的誤差;另一方面海腎螢光素酶也可以和螢火蟲螢光素酶一樣被用于常規(guī)的報(bào)告基因檢測。海腎螢光素酶催化Coelenterazine發(fā)光的zuì強(qiáng)發(fā)光波長為465nm。

注意事項(xiàng):
1. 為取得zuì佳測定效果,在用單管的化學(xué)發(fā)光儀測定時(shí),樣品和測定試劑混合后到測定前的時(shí)間應(yīng)盡量控制在相同時(shí)間內(nèi),例如30秒內(nèi);使用具有化學(xué)發(fā)光測定功能的多功能熒光酶標(biāo)儀時(shí),宜先把樣品全部加好,然后統(tǒng)一加入海腎螢光素酶檢測工作液。
2. 由于溫度對酶反應(yīng)有影響,所以測定時(shí)樣品和試劑均需達(dá)到室溫后再進(jìn)行測定。
3. 樣品和測定試劑混合后,必須等待1-2秒,再進(jìn)行測定。測定時(shí)間通常為10秒,根據(jù)情況也可以測定更長或更短時(shí)間,但是同一批樣品宜使用相同的測定時(shí)間。
4. 海腎螢光素酶檢測底物(100×)配制在無水乙醇中。由于無水乙醇容易揮發(fā),有時(shí)會在初次使用時(shí)發(fā)現(xiàn)體積明顯小于100μl的情況,此時(shí)用無水乙醇把體積補(bǔ)足至100μl,并混勻后即可使用。
5. 海腎螢光素酶檢測工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用,-20℃可以保存一周。隨著保存時(shí)間的延長檢測效果會不斷下降,因此不可配制成工作液后長期保存。
6. 為避免由于質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞時(shí)效率的差異而帶來的誤差,可以同時(shí)轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)奈灮鹣x螢光素酶的報(bào)告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參,采用百奧萊博的雙螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒(YT272)進(jìn)行檢測;也可以同時(shí)轉(zhuǎn)入β-半乳糖苷酶報(bào)告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參,然后采用百奧萊博的β-半乳糖苷酶報(bào)告基因檢測試劑盒(YT274)進(jìn)行檢測。采用本試劑盒中的報(bào)告基因細(xì)胞裂解液裂解獲得的樣品可以直接用于β-半乳糖苷酶報(bào)告基因檢測試劑盒(YT274)的檢測。

儲存條件:-20℃,有效期一年。

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