Carnoy固定液Ⅱ由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科學研究，本產品質量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多Carnoy固定液Ⅱ等免疫檢測產品請聯系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括Carnoy固定液Ⅱ在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：Carnoy固定液Ⅱ
產品貨號：GL0531
產品規格：100ml|500ml

用途：
又稱卡諾氏固定液，RNA\DNA染色的固定，糖原的固定，能清除血性標本，可以用于細胞學固定。

注意事項：
不含lǜ仿等有害物質。

儲存條件：室溫，12個月

根據您的關注的Carnoy固定液Ⅱ，您可能還對以下產品有需求：



名稱：DAB辣根過氧化物酶顯色試劑盒
貨號：YT075
規格：共20ml|共100ml
本試劑盒是一種借助辣根過氧化物酶(HRP)，用于免疫組化顯色、原位雜交顯色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜顯色的試劑盒。

DAB，即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride，是辣根過氧化物酶的常用底物。在辣根過氧化物酶的催化下，DAB會產生棕色沉淀。該棕色沉淀不溶于水和乙醇。因此在DAB顯色后，還可以使用溶于乙醇的染料進行后續染色。

本試劑盒可以用于細胞或組織在免疫組化或原位雜交時結合的辣根過氧化物酶顯色，也可以用于Western等結合有辣根過氧化物酶的膜的顯色檢測。同時也可以用于細胞或組織內源性的辣根過氧化物酶顯色。

用于免疫組化或原位雜交時，如果每個片子使用0.2毫升顯色液，那么本試劑盒共可以檢測100個片子。

儲存條件：-20℃，有效期一年。

名稱：WB轉印濾紙(12.5cm×12.5cm，100張/包)
貨號：ZN1897
規格：100張
Western Blotting快速蛋白轉移墊
產品保存：常溫保存，一年有效
產品說明：
Western blot 技術是在研究實驗室常規和通用的一項技術，其伴有三個主要缺點。，轉移蛋白至蛋白結合膜花費時間太長; 第二，轉移效率不恒定; 第三，轉移高分子量蛋白會出現一些問題。其它的缺點包括 ：轉移設備過熱，由于電流過大引起電能不足和印跡三明治組裝雜亂等。
根據顧客長期反饋的要求，目前向科研工作者推出 快速轉移墊，能夠有效解決上述的問題．每塊轉移墊減少轉移時間大于 50%,并且持續率的轉移。該項產品在不影響轉移效率的前提下，允許使用較低濃度的轉移緩沖液，從而避免了過熱和電能不足。本轉移墊在技術上結合了半干轉移的方便和濕轉的性，明顯減少了緩沖液的使用量。
選用此有效墊，確保了你的Western blot 高度有效，快速簡便,避免了大分子蛋白轉移過程引起的各種問題。

名稱：ECM Kit(大鼠IgG)
貨號：ZN1927
規格：1盒
用途：適于一抗為大鼠IgG的Western Blotting 檢測。
保存條件：4℃可保存一年 。
Western Blotting 檢測試劑盒內容：
1.封閉試劑：10g 蛋白質干粉(脫脂奶粉)。
2.HRP 標記兔抗大鼠IgG：0.1ml 親和純化抗體，經過人血清吸附以去除交叉抗體。效價 1：2000-10000。
3.ECM 顯色劑：總量 100ml。含 A 液 5ml(×20倍)；B 液 5ml(×20倍)。每個試劑盒足夠 10 張小膜或800 c㎡面積的膜顯色
工作原理：
蛋白質的電泳分離是重要的生物化學分離純化技術之一,電泳是指帶電粒子在電場作用下 ,向著與其電荷相反的電移動的現象。根據所采用的支持物不同,可分為：瓊脂糖凝膠電泳、淀粉凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。其中以聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)zuì廣泛。它的優點為：無電滲作用,樣品用量少(1-100μg),分辨率高,可檢出 10-9-10-12mol的樣品,凝膠機械強度大,重復性好以及可以通過調節單體濃度或單體與交聯劑的比例而得到孔徑不同的凝膠。SDS-PAGE 是zuì常用的定性分析蛋白質的電泳方式,它根據蛋白分子大小不同，遷移速率的不同而達到分離目的，特別是用于蛋白質純度檢測和測定蛋白質分子量。
免疫印跡是將凝膠電泳的高分辨力和免疫化學檢測的特異性融為一體。免疫印跡技術先借助凝膠電泳將蛋白質抗原分離，然后將凝膠中的蛋白質轉印到膜上使之成為被分離的一個拷貝。免疫印跡為檢測樣品中是否存在目的蛋白提供一種可靠的方法，該法鑒定蛋白質的原理是根據被測蛋白能與特異性抗體結合的特性并通過相對遷移率來體現該蛋白的分子量。如果想要了解樣品中是否存在某一抗原，以及該抗原的含量或該抗原多肽鏈的相對分子質量以及亞型，是否與其他蛋白結合，蛋白質的酪氨酸殘基是否發生磷酸化等有關問題均可采用免疫印跡。
免疫印跡包括多個簡單步驟，可在一到兩天完成，該方法具有，簡便，靈敏等特點。
實驗操作步驟：
1．蛋白質的樣品制備：
1)細胞培養蛋白質樣品的制備：
1：胰酶消化后裂解：細胞培養至 80%左右密度時，以含 0.25%胰蛋白酶消化,室溫，低速離心，棄上清。細胞經預冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根據細胞數量定)反復吹打。
2：皿上直接裂解：細胞培養至 80%左右密度時，細胞經預冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根據細胞數量定)，用細胞刮刀收集，轉移至離心管中，反復吹打。
2)組織樣品的制備：新鮮組織塊迅速置于預冷的生理鹽水中，漂洗數次，按組織凈重：裂解液=1：10的比例，加入相應體積的裂解液進行勻漿，離心收集上清(如有粘稠物可超聲處理)
3)蛋白變性：處理后的樣品加入樣品緩沖液(按樣品濃度 1：1或1：2的比例)混勻，樣品置 1000C的水浴箱加熱 3-5分鐘，10000g 離心 10分鐘，取上清液。(樣品可立即使用也可以分裝凍存，-20℃可穩定保持數月。)
2．SDS-PAGE 電泳：
1)．制 膠：①按比例配制分離膠(丙烯酰胺母液：單體：雙體=29：1)，緩緩地搖動溶液，使激活劑混合均勻，將凝膠溶液平緩地注入兩層玻璃中，再在液面上小心注入一層水或正丁醇，以阻止氧氣進入凝膠溶液中，37℃恒溫箱中靜置 60min。
②同前按比例配制濃縮膠，但混勻溶液時不要過于劇烈以免引入過多的氧氣。吸去不連續系統中下層分離膠上的水分，以連續平穩的液流注入凝膠溶液，然后小心插入梳子并注意不得在齒尖留有氣泡，37℃恒溫箱中靜置60min 以上以保證完全聚合。
2)加 樣：依次加入標準品和待分析樣品。(加樣時間要盡量短，以免樣品擴散，可在未加樣的孔中加入等量的樣品緩沖液避免邊緣效應。樣品一般在 1.0mm 厚的膠 加樣 50-100ug/lane)。
3)電 泳：加樣完畢，選擇適當的電壓進行電泳即可。一般采用恒壓濃縮膠 55V，分離膠 75V，電泳直至溴酚藍染料前沿下至凝膠末端處，即停止電泳。
3．轉 膜：蛋白質經 SDS-PAGE 分離后，從凝膠中轉移到固相支持物上，常用的支持物有：硝酸纖維膜即 NC 膜(AR0135)或PVDF 膜。Tris/甘氨酸-SDS-PAGE 結束后，取出凝膠，在 Tris/甘氨酸緩沖液中漂洗數秒。蛋白質從凝膠向膜轉移的過程普遍采用電轉印法，包括濕式電轉印和干式電轉印。
1)干式電轉印：將轉印槽陰平放工作臺上，并在上面加三張電轉印液浸透的1mm厚的濾紙，將電轉印液浸透 0.45μm的N.C 膜放在濾紙上，再將凝膠平放在 N.C 膜上，zuì后在凝膠上加蓋三層電轉印液浸透 1mm 厚的濾紙，電流根據凝膠面積按 1-2 mA/cm2,接通電源，經 1-1.5 小時電轉印。
2)濕式電轉印：打開電轉印夾，每側墊上一塊專用的用轉印液浸泡透的海面墊，再各放三塊轉印液浸透的濾紙，濾紙與海面墊大小相同或與 NC 膜、凝膠大小相同均可，將凝膠平放在陰側濾紙上，zuì后將 NC 膜平放在凝膠上，按照(-)夾板-海棉-濾紙-膠塊-NC 膜-濾紙-海綿-夾板(+)裝好,依次除盡每層間氣泡，夾好電轉印夾。 電泳槽加滿預冷電轉印液，插入電轉印夾，將電泳槽放入冰箱內，連接好電，接通電流，轉印夾的NC 膜應對電泳槽的正,4℃ 250-300mA,轉印 80min(根據
分子量不同，轉印時間可適當調整)。
4、膜的封閉：漂洗轉印膜,室溫，3次 x10min,以盡量洗去轉印膜上的SDS(以免影響抗體的結合)，放入 0.02M TBS 緩沖液配置的5%脫脂奶粉和 1%的BSA 混合的封閉液內，搖床搖動，室溫封閉 2h或4℃過夜。1×TBS-T ，PH7.6洗
液，室溫漂洗10min。
5、抗體雜交：1)封閉后的雜交膜放入雜交袋中，加入用 0.02M TBS 緩沖液配置的2%脫脂奶粉和 1%的BSA 混合的稀釋液適當稀釋的適當稀釋的一抗，4℃孵育過夜或37℃孵育2h，1×TBS-T ，PH7.6洗液洗膜 3次 x10min。(一抗的稀釋度，孵育時間，溫度與顯色強度，背景有直接關系。一般來說，陽性不強時可提高一抗濃度和延長孵育時間，而背景高，非特異性條帶多，則降低抗體濃度和孵育時間)。
2)用 0.02M TBS 緩沖液配置的2%脫脂奶粉和 1%的BSA 混合的稀釋液適當稀釋過氧化物酶標記兔抗大鼠IgG 孵育膜，20℃-37℃,1.5 小時或4℃過夜，1×TBS-T洗膜 3×10min。
6、顯色(ECM)
ECM顯色劑配制:按 1ml 蒸餾水，加顯色劑 A、B 各 1 滴混勻。將雜交后印跡膜放入顯色盒中,加上混合好的顯色液反應約 1-5分鐘。吸去印跡膜邊緣顯色液,將一透明的玻璃紙蓋住撫平,以確保×感光膠片的干燥。印跡膜轉入暗室中使膠片曝光 30＇-5分鐘。
7、顯影，定影。
將曝光后的×感光膠片放入顯影液中沖洗至膠片上出現條帶或者膠片透明為止,再放入定影液中定影，膠片可長期保存。

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貨號	名稱	規格
YT071	Western一抗二抗清除劑(強堿性)	250ml
YT090	免疫熒光染色二抗稀釋液	100ml
YT093	Kisser封片液(不含苯酚)	10ml
YT098	抗熒光淬滅封片液(強)	5ml
YT883	蛋白A和G瓊脂糖	2ml
YT888	YT?免疫熒光染色二抗稀釋液	100ml
SY0770	兔免疫組化(IHC)檢測試劑盒	150T

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