細胞核/胞漿分離試劑盒可以從哺乳動物細胞中分離細胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個系統，維持核和胞漿組分是分開和完整的。優化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿，而幾乎沒有交叉污染。本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能，適合下游分析如轉錄活性，RNA拼接，gel－shift分析，報告分析，酶活性分析和...

細胞漿/胞核分離試劑盒

 

產品編號：HR0241

產品組成：

細胞漿/胞核分離試劑盒保存條件：

提取液、核保存液2-8℃保存；蛋白酶抑制劑-20℃保存。有效期1年。

【注】：

● 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

● 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。

● 試劑拆封后請盡快使用完。

產品說明：

細胞核/胞漿分離試劑盒可以從哺乳動物細胞中分離細胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個系統，維持核和胞漿組分是分開和完整的。優化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿，而幾乎沒有交叉污染。

本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能，適合下游分析如轉錄活性，RNA拼接，gel－shift分析，報告分析，酶活性分析和WB等。

試劑盒以外自備試劑和儀器：

● 離心機 ● 振蕩器 ● 渦旋混勻器 ● PBS ● 蛋白定量試劑盒

使用注意事項：

● 預實驗很重要。必須要做預實驗，在正式實驗之前取少量樣本優化實驗條件，并像正式樣本一樣認真進行，看實驗結果是否可行，實驗條件是否適合自己的樣本。由于生物樣本的多樣性，不同贗本的實驗條件通常差異較大，同種細胞的不同模型下需要的實驗條件也可能不同，為了避免浪費正式樣本和試劑，一定要提前預實驗優化實驗條件。

● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

● 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

● 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

● 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

細胞漿/胞核分離試劑盒使用方法：

1、取5-10×10⁶個細胞，在4℃，500×g條件下離心3分鐘，小心吸取培養基，盡可能吸干，收集細胞。

2、用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

【注】：

● 在4℃，500×g條件下離心5分鐘。

3、在細胞沉淀中加入400μL冷的提取液A，渦旋振蕩混勻或吹打混勻，置冰上振蕩20-30分鐘。

● 使用振蕩器/搖床的較低轉速，提取液能輕微晃動即可。

● 如果沒有振蕩條件，也可冰上靜置，稍微延長處理時間，中間每隔5分鐘渦旋振蕩或移液器吹打混勻。

● 細胞數量根據實驗情況調整，每次的提取液用量并不是一定的，大約為細胞體積的5-10倍即可，請根據實際情況調整。

● 可以根據自己實驗需要在每400μL提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑。

4、在4℃，1200×g條件下離心5分鐘。

5、將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即得到胞漿組分，請置冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

6、沉淀用PBS重懸，然后在4℃，2000×g 條件下離心5分鐘，棄上清。

7、沉淀為細胞核組分，將沉淀用200μL保存液B 重懸后保存備用或直接用于下游實驗。

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