HR0243 組織胞漿/胞核分離試劑盒

組織樣本細胞核/胞漿分離試劑盒可以從各種動物實體組織如腦、脊髓、神經結或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結締組織等組織樣本中分離細胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個系統,維持核和胞漿組分是分開和完整的。優化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿,而幾乎沒有交叉污染。...
組織胞漿/胞核分離試劑盒
產品編號:HR0243
產品組成:
組份 |
50T |
100T |
組分A:核提取液A |
25mL |
50mL |
組分B:核保存液B |
10mL |
20mL |
組分C:蛋白酶抑制劑混合物 |
100μL |
200μL |
組織胞漿/胞核分離試劑盒儲存條件:
試劑A和B 2-8℃保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存,有效期1年。
【注】:
● 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
● 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
產品簡介:
組織樣本細胞核/胞漿分離試劑盒可以從各種動物實體組織如腦、脊髓、神經結或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結締組織等組織樣本中分離細胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個系統,維持核和胞漿組分是分開和完整的。優化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿,而幾乎沒有交叉污染。
本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能,適合下游分析如轉錄活性,RNA拼接,gel-shift分析,報告分析,酶活性分析和WB等。
本試劑盒提取得到的為完整結構的細胞核,需要提取得到核蛋白請選擇其他貨號的試劑盒。
試劑盒以外自備試劑和儀器:
● 勻漿機/勻漿器 ● 移液器 ● 離心機 ● 渦旋混勻器 ● 振蕩器 ● PBS ● 蛋白定量試劑盒
組織胞漿/胞核分離試劑盒注意事項:
● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
● 實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
● 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
● 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
使用方法:
1、取50mg-100mg組織樣本,用PBS洗干凈,用手術剪刀盡可能剪碎,加入500μL冷的試劑A,用組織勻漿機/勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
【注】:
● 也可以用液氮研磨后加入500μL試劑A。
2、將勻漿液置2-8℃條件下振蕩20-30分鐘。
【注】:
● 用振蕩器/搖床的較低轉速,保持液體有輕微晃動即可。
● 沒有振蕩條件的話,也可冰上靜置,稍微延長處理時間,中間每隔5分鐘渦旋振蕩或移液器吹打混勻。
● 組織樣本量根據實驗情況調整,每次的提取液用量并不是一定的,大約為組織體積的5-10倍即可,請根據實際情況調整。
● 可以根據自己實驗需要在每500μL提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑。
3、在4℃,1200×g條件下離心5分鐘。
4、將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即得到胞漿組分,請置冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
5、沉淀用PBS洗滌一次,在4℃,2000×g條件下離心15分鐘,棄上清。
6、沉淀為細胞核組分,將沉淀直接用于下游實驗或用200μL保存液B重懸后保存備用。
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