本試劑盒按每個樣本處理2mL乳汁/唾液計，每個50T試劑盒大約可以用于提取100mL乳汁/唾液。如果需要處理大量的乳汁/唾液，將提取液按說明書標準操作的體積等比例調整即可。...

外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)

 

產品編號：HR8208

試劑盒組成：

儲存條件：

2-8℃保存，有效期1年。

產品簡介：

總外泌體提取試劑盒（乳汁/唾液用）適用于從各種乳汁/唾液樣品中提取總外泌體。不需要超速離心，僅需通過簡單的常規離心即可從樣本中獲取大量結構完整的外泌體，具有快速簡單，提取效率高的特點，可節省更多的實驗時間和樣本。提取的外泌體可根據實驗目的用于后續的多種實驗，應用范圍廣泛。

外泌體是活細胞分泌的來源于晚期核內體(也稱為多囊泡體)的膜性小囊泡，直徑約為30-150nm，天然存在于血液、唾液、尿液和母乳等各種體液中，研究發現，Exosome內含有與細胞來源相關的蛋白質、mRNA 和microRNA，并且exosome能夠通過生物屏障，在細胞間傳遞功能性核酸分子，從而發揮各種生物學功能。

外泌體囊泡已經成為細胞間通訊的重要介質，參與原核生物和高等真核生物細胞之間的生物信號傳遞，以調節不同范圍的生物過程。外泌體囊泡的病理生理作用開始在包括癌癥、感染性疾病和神經變性疾病在內的疾病中得到充分認識，顯現了外泌體作為疾病的早期診斷、治療干預的潛在新靶點的巨大應用前景。此外，未修飾和工程化的外泌體囊泡可能在大分子藥物遞送中具有應用價值。

傳統的乳汁/唾液中分離和提取exosome 的主要方法是超速離心法，這種方法缺點是耗時耗力，往往需要30-70個小時，每次最多只能處理6個樣品，需要大量的起始材料，而且產量不高。

我公司的外泌體快速提取試劑盒產品，可以通過簡單離心快速高效獲得高純度外泌體顆粒。本試劑盒提取的外泌體完好無缺，能用于各種功能研究、蛋白分析及RNA 分析等下游應用實驗。

本試劑盒按每個樣本處理2mL乳汁/唾液計，每個50T試劑盒大約可以用于提取100mL乳汁/唾液。如果需要處理大量的乳汁/唾液，將提取液按說明書標準操作的體積等比例調整即可。

產品特點：

● 使用方便，無需超速離心，省時省力；

● 純度高，富集量大，應用范圍廣；

● 獲取的Exosome 結構和功能完整；

● 穩定性好，便于運輸，便于保存。

外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)試劑盒以外自備試劑和儀器：

● 離心機 ● 移液器

使用注意事項：

● 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑。

● 以下以2mL乳汁/唾液為例，實際操作時按乳汁/唾液樣本和提取液用量體積比等比例調整使用即可。

● 不同乳汁/唾液樣本外泌體數量差異極大，請根據實際情況選擇乳汁/唾液樣本的量，根據下游應用和參考文獻確定。條件允許的情況下采用盡可能多的乳汁/唾液樣本。

● 常規的乳汁/唾液樣本最佳上樣量為5-10mL及以上，條件允許的情況下采用盡可能多的乳汁/唾液樣本。

● 已經分離好的外泌體樣本如果需要進行電鏡觀察，只能冰上或4℃保存，存放時間不超過兩天，注意不可冷凍保存，否則可能會影響電鏡觀察效果。

使用方法：

1、收集2mL待提取的乳汁/唾液樣品，置2-8℃保存。

【注】：

● 凍存樣品解凍后置2-8℃保存。

2、將樣品在4℃條件下，3000×g離心15分鐘。棄沉淀，收集上清。

3、小心將上清移入另一干凈離心管中。

4、將樣品在4℃條件下，10000×g離心20分鐘。棄沉淀，收集上清。

5、小心將上清移入另一干凈離心管中。

6、在2mL乳汁/唾液樣品中加入2mL提取液A，蓋緊離心管蓋，上下顛倒混勻1分鐘左右，使液體充分混勻。

7、在4mL液體樣品中加入1mL提取液B，蓋緊離心管蓋，上下顛倒混勻1分鐘左右，使液體充分混勻。

【注】：

● 試劑B使用前請充分混勻。

8、置2-8℃冰箱靜置過夜。

【注】：

● 靜置保存時間不少于10小時。

9、在4℃條件下，10000×g離心60分鐘。

10、小心移除上清，收集沉淀。

【注】：

● 盡可能吸干上清。

● 吸取時小心，防止吸掉沉淀。

11、取50-100μL外泌體保存液將沉淀重懸，即得到外泌體樣品。

【注】：

● 可以不用試劑盒中的外泌體保存液試劑C，根據下游實驗需要用自己的其它緩沖液重懸保存外泌體。

● 也可直接用于蛋白提取。

12、將外泌體樣本-80℃保存或直接用于下游應用。

【注】：

● 外泌體短期保存置于2-8℃保存即可，一周以上長期不用時置-80℃保存。

● 保存前可以用0.22μm過濾除菌。

外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)常見問題分析：

● 如何鑒定提取的外泌體？

通常使用透射電鏡檢測（形態）、粒徑檢測（大小）、外泌體標志蛋白Western blot檢測等方法鑒定提取的外泌體。

● 外泌體WB標志蛋白用什么？

在進行WB檢測時，通常檢測外泌體標志蛋白為CD63、CD9、CD81、TSG101、ALIX、HSP70 等。

● 進行外泌體WB鑒定時有什么內參蛋白可供選擇？

沒有，該檢測屬于定性檢測。

● 蛋白濃度低？

很多細胞外泌體量不夠下游應用，在條件允許的情況請盡可能加大培養上清的上樣量。

處理部分樣本時可能沒有裂解完全，導致蛋白濃度低。請選擇高質量的蛋白裂解液或蛋白提取試劑盒。

● 抽提得到的RNA 濃度低？

很多細胞外泌體量不夠下游應用，在條件允許的情況請盡可能加大培養上清的上樣量。

如果您覺得“HR8208 外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)”描述資料不夠齊全，請聯系我們獲取詳細資料。(聯系時請告訴我從給覽網看到的，我們將給您最大優惠！)
本頁鏈接：http://www.vn-obr.cn/com_bjbiolab/sell/itemid-9458977.html
已經有929位訪客查看了本頁.