姬姆染色液的操作步驟及注意事項(xiàng)

  姬姆薩色素(又稱吉姆薩色素)是由天青Ⅱ與伊紅混合而成。Giemsa染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同，姬姆薩染色液對(duì)胞漿著色力較強(qiáng)，能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度，特別是對(duì)血液和骨髓細(xì)胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒，著色清晰，但是對(duì)胞核著色偏深，核結(jié)構(gòu)顯色不佳，故姬姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用。

  操作步驟：

  1、滴加姬姆染色液A液(0.5-0.8ml)于涂片上，并讓染液覆蓋整個(gè)標(biāo)本涂色片染色1分鐘。

  2、將姬姆薩染色液B液滴加于A液上面(滴加之量為A液的2-3倍)以洗耳球吹出微風(fēng)使液面產(chǎn)生漣漪狀，使兩液充分混合，染色3-10分鐘。

  3、水洗(沖洗時(shí)不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖去，以防有沉渣沉淀在標(biāo)本上)。

  4、干燥，鏡檢。

  注意事項(xiàng)：

  1. 血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻，以免影響染色效果。

  2. 涂片染色中 Giemsa 染色后，請(qǐng)勿先去除染液或直接對(duì)涂片用力沖洗。

  3. 如果染色過深或過淺，應(yīng)調(diào)整染色時(shí)間或工作液濃度。

  4. 涂片染色和組織切片染色中，pH值對(duì)染色有一定影響，載玻片應(yīng)清潔、無酸堿污染，以免影響染色效果。

  5. 染色液經(jīng)稀釋后液面應(yīng)金屬光澤則表示染液有染色作用，否則染色液可能失效。

  6. 組織切片染色中，染色后需用大量0.1～0.5%乙酸急速?zèng)_洗，避免浮面沉淀物污染切片后難以洗脫。

  7. 0.5%乙酸分化常用于Giemsa組織切片染色，如有必要亦可用于細(xì)胞涂片，但其濃度應(yīng)適量下調(diào)。0.5%乙酸分化切片時(shí)，切片呈粉紅色即可終止。

  8. Giemsa組織切片染色中，無水乙醇脫水要迅速，否則切片易褪色。

  9. 涂片染色和組織切片染色中，如需急速獲得結(jié)果，可按Giemsa Stain儲(chǔ)存液(10×):磷酸鹽緩沖液=1:1配制Giemsa工作液，充分混勻，即為快速Giemsa染色工作液，將染色液滴加于細(xì)胞涂片或組織切片上，加熱染色，20～30s后重新加染色液，反復(fù)5～10次，其余步驟同上。

  10. 染色液可重復(fù)使用，但不能多次重復(fù)，若有沉淀物應(yīng)過濾后使用。

  11. Regaud固定液: 按3%重鉻酸鉀:甲醛=4:1配制，臨用前混勻，1～2天后失效。

  有效期：24個(gè)月有效。

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