如何完善ELISA試劑盒實驗中的過失

  ELISA試劑盒操作步驟多，新手操作難免會有過失。而這些過失很多是由細節不夠好造成的，減少過失的方法有很多，比如做實驗時少說話，防止唾液掉進酶標條中。我們該如何完善ELISA試劑盒實驗中的過失?

  ①：評估試劑的實用性，試劑的穩定與否，對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗，判定試劑符合要求后方可使用。

  ②：操作前仔細閱讀說明書，嚴格按照說明書要求進行規范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方，反復試驗確定成立后才能改進，比如洗板次數的掌握等。

  ③：加樣要準確、快速。加樣不準確，酶生成物的量不能確定，直接影響顯色結果。另外，顯色的深淺及A值的測定與加入顯色 劑和終止液的量有關，所以加樣應慎重。要求在一定時間內加樣完畢的實驗，如果加樣遲緩，便出現誤差，而且試劑長時間暴露在外，尤其室溫過高時，保存期會縮短甚至失效。

  ④：檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有一定總結和分析問題的能力，對實驗中出現的意外情況能及時妥善解決。

  ⑤：使用校對過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。

  ⑥：嚴格掌握顯色時間，顯色時間過短，加入終止液反應終止后，底物結合物的量過少，易出現假陰性。超過顯色要求時間后顯色，應判為假陽性，這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色，不可報陽性，這可能是本底顯色的結果。

  ⑦：洗滌徹底，洗板不徹底，酶結合物本底顯色會呈現假陽性。另外，洗滌液要新鮮，現用現配，陳舊的洗滌液會出現本底增高現象，也可能出現假陽性。

  ⑧：嚴控反應時間，反應時間過長，酶失活;反應時間過短，酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合，生成物結構松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。

  ELISA上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒