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上海哈靈生物科技有限公司

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脂肪酸β氧化速率比色法檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

發(fā)布時(shí)間:2017-09-29瀏覽次數(shù):2098返回列表

主要用途

脂肪酸β氧化速率(β oxidation rate)比色法檢測試劑是一種旨在通過棕櫚酰肉堿氧化依賴性鐵還原,即單位時(shí)間還原產(chǎn)物的峰值降低,即采用比色法來測定線粒體裂解樣品中脂肪酸β氧化速率的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞、組織中線粒體裂解懸液樣品(動物、人體等)脂肪酸β氧化速率的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。

技術(shù)背景

脂肪酸β氧化過程(β-oxidation)在動物組織的線粒體發(fā)生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉(zhuǎn)移、β氧化及后經(jīng)三羧酸循環(huán)被徹底氧化生成CO2和H2O,并釋放能量等四個(gè)階段,是體內(nèi),尤其是組織器官,例如肝臟、心臟和骨骼肌等能量內(nèi)平衡的關(guān)鍵代謝通路。食物中甘油三酯提供體內(nèi)三分之一的能量供給,骨骼肌和心臟消耗80%的總能量。脂肪酸代謝異常,將導(dǎo)致脂質(zhì)聚集在非脂肪組織內(nèi),產(chǎn)生慢性病的病理基礎(chǔ),例如糖尿病、心衰、肥胖癥等。其中β氧化,包括脫氫、水合、二次脫氫和硫解,是將活化的各種長度脂酰輔酶酯(acyl CoA esters)不斷縮短為乙酰輔酶A(acetyl CoA)單位,后經(jīng)過三羧酸循環(huán)和呼吸鏈氧化成CO2和水。脂酰基輔酶A脫氫酶(acyl CoA dehydrogenase;AD;EC.1.3.99.3)是脂肪酸代謝進(jìn)入β-氧化后工作的重要酶之一。通過底物棕櫚酰肉堿(palmitoyl carnitine)的氧化產(chǎn)生的電子,由鐵(ferricyanide)捕獲而還原,其還原速率的檢測,來評價(jià)β氧化的速率,即吸光值(420nm波長)的下降與時(shí)間的對應(yīng)關(guān)系。 

用戶自備

1.5毫升離心管:用于反應(yīng)操作的容器
比色皿:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析

注意事項(xiàng)

1.本產(chǎn)品為20次操作,包括背景對照
2.操作時(shí),須戴手套
3.系統(tǒng)操作過程中,背景測定只需1次
4.樣品須澄清,至關(guān)重要 
5.加樣后3秒內(nèi)比色測定
6.測定值由高到低變化;測定可持續(xù)5分鐘
7.比色測定后,比色皿須清洗徹底
8.樣本測定0分鐘讀數(shù)高于5分鐘讀數(shù)表明具有氧化功能
9.建議待測樣本線粒體蛋白濃度為500微克/50微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-30030.1) 
10.如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度
11.本公司提供系列脂肪酸代謝檢測試劑產(chǎn)品
 
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感